YY/T 1699-2020 組織工程醫(yī)療器械產(chǎn)品 殼聚糖

范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用于制備組織工程醫(yī)療器械產(chǎn)品的殼聚糖及其鹽的要求、試驗(yàn)方法等。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于制備組織工程醫(yī)療器械產(chǎn)品的殼聚糖及其鹽。

術(shù)語(yǔ)和定義
下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。
殼聚糖  chitosan
由2-氨基-2-脫氧-D-吡喃葡萄糖(GlcN)和2-乙酰氨基-2-脫氧-D-吡喃葡萄糖(GlcNAc)通過β(1→4)連接而成的線性多糖。其結(jié)構(gòu)式為:


脫乙酰度  degreeofdeacetylation
一個(gè)殼聚糖分子中葡萄糖胺單元(脫乙酰基的單元)的摩爾分?jǐn)?shù)。

分類
按照是否與酸結(jié)合，可分為殼聚糖、殼聚糖鹽酸鹽、殼聚糖乙酸鹽、殼聚糖谷氨酸鹽和殼聚糖乳酸鹽。

動(dòng)物源性材料要求
動(dòng)物組織中提取制備的殼聚糖及其鹽應(yīng)按照 YY/T 0771.1、YY/T 0771.2、YY/T 0771.3 的要求進(jìn)行管理和控制。

要求
性狀
類白色或淡黃色粉末狀、絲狀或片狀的固體，無(wú)臭。
傅里葉變換紅外光譜(FT-IR)
殼聚糖或殼聚糖鹽傅里葉變換紅外光譜應(yīng)符合相應(yīng)的特征峰，寬峰(b)數(shù)值偏差不大于150cm^-1，其他峰數(shù)值偏差不大于20cm^-1。殼聚糖或殼聚糖鹽典型的FT-IR頻率(cm^-1)如表1所示。


含量
以干燥品計(jì)算，殼聚糖或其鹽的含量應(yīng)不小于85%。
脫乙酰度
應(yīng)為標(biāo)示值的90%~110%。
pH
殼聚糖檢測(cè)液的pH應(yīng)為5.0~8.0；殼聚糖鹽檢測(cè)液的pH應(yīng)為4.0~6.0。
動(dòng)力黏度
在20°C時(shí)殼聚糖的動(dòng)力黏度不得超過標(biāo)示量的 80%~120%。
注: 以mPa·s或Pa·s為單位標(biāo)明黏度。
重均分子量及相對(duì)分子質(zhì)量分布
殼聚糖或其鹽重均分子量和相對(duì)分子質(zhì)量分布(Mw/Mn)由制造商確定。
重金屬含量
重金屬含量(以Pb計(jì))應(yīng)不大于10μg/g(質(zhì)量分?jǐn)?shù))。
蛋白質(zhì)含量
殼聚糖蛋白質(zhì)殘留量應(yīng)不大于0.2%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))。
乙醇等有機(jī)溶劑殘余量
乙醇?xì)堄嗔繎?yīng)不大于0.5%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))。
注: 如在加工過程中使用了除乙醇之外的其他有機(jī)溶劑，干燥失重應(yīng)不大于10%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))。
熾灼殘?jiān)?br style="padding: 0px; margin: 0px;"/>應(yīng)不大于1.0%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))。
不溶物
應(yīng)不大于0.5%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))。
砷鹽
不得過百萬(wàn)分之一。
細(xì)菌內(nèi) 毒素含量
每1.0mg殼聚糖或其鹽細(xì)菌內(nèi)毒素含量應(yīng)小于0.05EU。
注: 如果以非無(wú)菌的方式提供，則最終用戶需進(jìn)行去除細(xì)菌內(nèi)毒素的處理以達(dá)到細(xì)菌內(nèi)毒素要求。
無(wú)菌試驗(yàn)
應(yīng)無(wú)菌。如果殼聚糖或其鹽以無(wú)菌方式提供，應(yīng)進(jìn)行該項(xiàng)目的檢測(cè)，并按照 GB 18278.1、GB 18279.1、GB18280.1 進(jìn)行無(wú)菌工藝確認(rèn)。如果采用環(huán)氧乙烷滅菌，還應(yīng)按照 GB/T 16886.7 對(duì)其殘留量進(jìn)行控制和檢測(cè)。
微生物限度
每克(g)供試品中需氧菌總數(shù)小于100CFU，霉菌和酵母菌菌落數(shù)小于20CFU，不得檢出金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌和大腸埃希菌。
注: 如果殼聚糖或其鹽以非無(wú)菌的方式提供，則進(jìn)行該項(xiàng)目的檢測(cè)。
生物學(xué)性能
應(yīng)按照 GB/T 16886.1 的要求對(duì)殼聚糖及其鹽進(jìn)行生物學(xué)評(píng)價(jià)。

試驗(yàn)方法
脫乙酰度
脫乙酰度可采用以下方法測(cè)定，但不限于以下方法，應(yīng)符合"脫乙酰度"規(guī)定。
殼聚糖鹽樣品的制備
稱取約2g殼聚糖鹽，置燒杯中，加乙醇100mL，邊攪拌邊滴加10%氫氧化鈉溶液，至pH大于8。過濾，用水洗滌沉淀物至洗出液呈中性，50°C干燥4h，再于105°C干燥至恒重，作為供試品。

脫乙酰度測(cè)定——酸堿滴定法
準(zhǔn)確稱取在105°C下干燥至恒重的樣品0.2g~0.3g，置于250mL錐形瓶中，加入0.1mol/L的鹽酸滴定液30mL，在20°C~25°C下攪拌至溶解(可加入適量水稀釋)。加入甲基橙-苯胺藍(lán)(將0.1%的甲基橙水溶液和0.1%苯胺藍(lán)水溶液以1:2體積比混合)指示劑5滴~6滴，用氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)滴至紅色褪去。按式(1)和式(2)計(jì)算。

式中:
p  ——樣品中氨基含量，%；
c₁ ——鹽酸滴定液的濃度，單位為摩爾每升(mol/L)；
V₁——鹽酸滴定液的體積，單位為毫升(mL)；
c₂ ——?dú)溲趸c滴定液的濃度，單位為摩爾每升(mol/L)；
V₂——?dú)溲趸c滴定液的體積，單位為毫升(mL)；
16——氨基的相對(duì)分子質(zhì)量；
m ——樣品質(zhì)量，單位為克(g)；
D.D——樣品的脫乙酰度，%；
203——N-乙酰氨基-D-葡萄糖結(jié)構(gòu)單元相對(duì)分子質(zhì)量；
42 ——乙?；南鄬?duì)分子質(zhì)量。

脫乙酰度測(cè)定——雙突躍電位滴定法
準(zhǔn)確稱取在105°C下干燥至恒重的樣品0.2g~0.3g，加入過量的0.1mol/L鹽酸滴定液，攪拌至溶解。然后在電位滴定裝置上用氫氧化鈉滴定液滴定，氫氧化鈉滴定液首先中和過量的HCl，pH出現(xiàn)急劇上升，即第一個(gè)突變，然后氫氧化鈉滴定液再中和與殼聚糖的氨基結(jié)合的鹽酸，達(dá)到滴定等當(dāng)點(diǎn)時(shí)，pH出現(xiàn)第二個(gè)突變，兩個(gè)突躍點(diǎn)消耗的氫氧化鈉摩爾數(shù)相當(dāng)于樣品中的氨基摩爾數(shù)。按式(3)計(jì)算。

式中:
D.D——樣品的脫乙酰度，%；
ΔV ——兩突躍點(diǎn)之間消耗的氫氧化鈉滴定液體積之差，單位為毫升(mL)；
c_NaOH——?dú)溲趸c滴定液的濃度，單位為摩爾每升(mol/L)；
m ——樣品質(zhì)量，單位為克(g)；
16——氨基的相對(duì)分子質(zhì)量；
0.0994——理論氨基含量。
以方法"脫乙酰度測(cè)定——雙突躍電位滴定法"為仲裁方法。


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